1型糖尿病是由胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌不足所致，目前，主要通过外源性胰岛素补充来治疗，但外源性胰岛素无法精准调控血糖，严重低血糖可危及生命。胰岛移植是一种替代疗法，但面临器官供体不足和异种来源胰岛β细胞存在人畜共患病交叉感染风险的问题。因此，获得足量且安全的胰岛β细胞是1型糖尿病细胞治疗面临的难题。本研究旨在通过人诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells, hiPSCs）在体外向胰岛β细胞分化，提供一种潜在的1型糖尿病治疗新策略。为实现这一目标，我们采用了结合2D和3D培养系统的分化策略，模拟胰岛β细胞的体内发育环境，并使用多种生长因子调节在胰腺发育和β细胞分化中发挥重要作用的关键信号包括Notch信号通路（Notch signaling pathway）、Wnt信号通路（Wnt signaling pathway）、TGF-β/Smad信号通路（TGF-β/Smad signaling pathway）等，在体外将hiPSC定向诱导分化至胰岛β细胞。结果显示，在2D、3D结合的培养条件下，分化过程中定型内胚层细胞，胰腺祖细胞，胰腺内分泌细胞及胰岛β细胞阶段的特异性基因的表达显著提高（P＜0.05）,并在胰岛素含量及葡萄糖刺激后表现出显著增强的胰岛素分泌能力（P＜0.05）。总之，本研究成功建立了一种从hiPSC到功能性胰岛β细胞的分化策略，为1型糖尿病提供了一种新的细胞治疗途径。这种方法不仅为研究胰岛β细胞的发育生物学提供了新的工具，也为临床应用提供了一种潜在的胰岛β细胞来源，有望解决现有治疗方法的局限性。